Aspectos epidemiológicos e biologia molecular para investigação molecular da circulação de arbovírus de interesse em saúde pública em hospedeiros caninos e em população natural de vetores Aedes (Stegomyia) aegypti (linnaeus, 1762) em município.

Doutorado em Ciência Animal com Enfase em Produtos Bioativos
Autor: Robson Michael Delai
Orientador: Daniela Dib Gonçalves
Defendido em: 18/03/2022

Resumo

Atualmente, a metodologia adotada para o controle do Aedes aegypti e consequentemente para a prevenção e controle da Dengue, Zika e Chikungunya, em todo o território nacional, é definida pelo Programa Nacional de Controle da Dengue. Há necessidade da criação e implantação de um sistema que permita monitorar em tempo real os fatores determinantes á disseminação de doenças. Na cidade de Foz do Iguaçu, Paraná, Brasil, localizada em uma região Transfronteiriça entre Brasil, Paraguai e Argentina, a vigilância integrada de Arboviroses esta implantada desde 2017. Agentes de endemias do Centro de Controle de Zoonoses de Foz do Iguaçu trabalham em metodologias de abordagem One Health. Nessa abordagem, a detecção de arbovírus em mosquitos e animais domésticos por qRT-PCR admitem resultados assertivos e rápidos, permitindo tomadas de decisões em tempo epidemiológico oportuno. Um problema encontrado nessa metodologia é que a maioria dos kits de diagnóstico para arboviroses são utilizados em humanos e carecem de padronização para “reservatório” deste vírus, fornecendo considerações sobre a utilização como animais sentinela para dengue. Este trabalho contribuiu efetivamente para estruturação e consolidação de ações usadas em mosquitos e animais domésticos. Embora o papel dos seres humanos como o principal hospedeiro que mantém os ciclos epidêmicos das arboviroses seja esclarecido, não é consenso que os vírus da Dengue, Zika e Chikungunya possam ser mantidos em regiões endêmicas em um ciclo enzoótico. Trabalhar com essas técnicas em locais onde existe um sistema de monitoramento contínuo implantado, facilita a amostragem de dados e possibilita um melhor controle da disseminação viral e coleta de dados e permite um melhor controle da disseminação viral e um controle epidemiológico. Objetivou-se identificar arboviroses circulantes na população humana: Dengue, Zika e Chikungunya em fêmeas de Aedes aegypti capturadas em armadilhas distribuídas e georreferenciadas nos distritos sanitários do município, bem como a identificação dos mesmos vírus em cães semi-domiciliados dos mesmos distritos. Como base de análise, fusou-se os casos de notificação do mesmo período de coletas de Aedes e cães, obtidos a partir do Sistema de Informação de Agravos de Notificação. A partir dessas informações desenhou-se mapas de distribuição espacial, cruzando informações georreferenciadas de armadilhas e de cães com os casos de agravos de notificação. Para Aedes (7,9%) pools apresentaram resultado positivo para o vírus DENV2. Os mosquitos positivos para DENV eram provenientes de regiões de alta incidência de dengue ou em áreas adjacentes a estas, demonstrando que é possível identificar a presença de DENV2 em mosquitos com o respectivo kit, reforçando a utilização qRT-PCR como uma ferramenta diagnóstica robusta para a vigilância epidemiológica permitindo resultados em tempo oportunos para a tomada de decisões de prevenção e controle. No caso dos cães, a presença do DENV-4 em seis (6%) dos animais. Resultados encontrados confirmam a ocorrência de infecção por DENV em cães de áreas urbanas endêmicas, indicando a possibilidade desta espécie se comportar como um possível “hospedeiro reservatório” deste vírus, fornecendo considerações sobre sua utilização como animais sentinelas para dengue. Este trabalho contribui efetivamente para a estruturação e consolidação das ações de vigilância de arboviroses de interesse em Saúde Pública em áreas vulneráveis à emergência e reemergência; Novas interpretações sobre a epidemiologia das arboviroses citadas, transformou a Biologia Molecular como efetiva ferramenta de monitoramento e controle das arboviroses, inserida na rotina dos serviços do município.

Palavras-chave

Arboviroses. Cães. Mosquitos. qRT-PCR. Detecção.

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Title

Epidemiological aspects and molecular biology for molecular investigation of the circulation of arbovirus of interest in public health in canine hosts and in a natural population of aedes (stegomyia) aegypti (linnaeus, 1762) vectors in a municipality

Abstract

Currently, the methodology adopted for the control of Aedes aegypti and consequently for the prevention and control of Dengue, Zika and Chikungunya throughout the national territory is defined by the National Dengue Control Program. There is a need to create and implement a system that allows monitoring in real time the factors that determine the spread of diseases. In the city of Foz do Iguaçu, Paraná, Brazil, located in a cross-border region between Brazil, Paraguay and Argentina, the integrated surveillance of arboviruses has been implemented since 2017. Endemic agents from the Foz do Iguaçu Zoonoses Control Center work on One Health approach methodologies. In this approach, the detection of arboviruses in mosquitoes and domestic animals by qRT-PCR admits assertive and rapid results, allowing decision-making in timely epidemiological time. A problem found in this methodology is that most diagnostic kits for arboviruses are used in humans and lack standardization for the “reservoir” of this virus, providing considerations on the use as sentinel animals for dengue. This work effectively contributes to the structuring and consolidation of actions used on mosquitoes and domestic animals. Although the role of humans as the main host that maintains epidemic cycles of arboviruses is clear, there is no consensus that Dengue, Zika and Chikungunya viruses can be maintained in endemic regions in an enzootic cycle. Working with these techniques in places where there is a continuous monitoring system in place, facilitates data sampling and enables better control of viral dissemination and data collection and allows better control of viral dissemination and epidemiological control. The objective was to identify circulating arboviruses in the human population: Dengue, Zika and Chikungunya in Aedes aegypti females captured in traps distributed and georeferenced in the sanitary districts of the municipality, as well as the identification of the same viruses in semi-domiciled dogs of the same districts. As a basis for analysis, the reported cases of the same collection period of Aedes and dogs, obtained from the Notifiable Diseases Information System, were merged. Based on this information, spatial distribution maps were drawn, crossing georeferenced information on traps and dogs with cases of notifiable diseases. For Aedes (7.9%) pools were positive for the DENV2 virus. The DENV-positive mosquitoes came from regions with a high incidence of dengue or adjacent areas, demonstrating that it is possible to identify the presence of DENV2 in mosquitoes with the respective kit, reinforcing the use of qRT-PCR as a robust diagnostic tool for the epidemiological surveillance allowing timely results for decision-making on prevention and control. In the case of dogs, the presence of DENV-4 in six (6%) of the animals. Results found confirm the occurrence of DENV infection in dogs from endemic urban areas, indicating the possibility of this species to behave as a possible “reservoir host” of this virus, providing considerations on its use as sentinel animals for dengue. This work effectively contributes to the structuring and consolidation of surveillance actions for arboviruses of interest to Public Health in areas vulnerable to emergence and re-emergence; New interpretations on the epidemiology of the aforementioned arboviruses, transformed Molecular Biology into an effective tool for monitoring and controlling arboviruses, inserted in the routine of municipal services.

Keywords

Arboviruses. Dogs. Mosquitoes. qRT-PCR. Detection