Pesquisa
Aspectos farmacológicos e fitoquímicos do extrato obtido das folhas de Annona muricata
Mestrado em Ciência Animal com Ênfase em Produtos Bioativos
Autor: Mariane de Almeida Machado
Orientador: Zilda Cristiani Gazim
Defendido em: 12/02/2025
Resumo
Esta dissertação encontra-se dividida em dois capítulos. O Capítulo 1 teve por objetivo realizar uma revisão bibliográfica sobre os aspectos químicos, biológicos e farmacológicos de Annona muricata. A metodologia consistiu na realização de levantamento bibliográfico, utilizando como fontes de pesquisa acadêmica Google Acadêmico, Scielo e Science Direct. Adotou-se descritores específicos, com foco em publicações sobre “composição química”, “atividades farmacológicas”, “análise botânica” e “biológica” de Annona muricata. Os resultados levantados proporcionaram a construção do corpo do trabalho, constituindo os aspectos históricos e descritivos sobre a espécie Annona muricata. Também, foram descritos os aspectos botânicos bem como a sinonímia científica e a localização geográfica da espécie. Abordou-se, ainda, os aspectos químicos, farmacológicos e a utilização na medicina tradicional. O Capítulo 2 teve como objetivo a investigação do fator de proteção solar (FPS), e atividades antiproliferativa, inibidora da produção de óxido nítrico e antioxidante do extrato bruto (EB) das folhas de Annona muricata. Os extratos brutos foram obtidos pelo processo de maceração dinâmica com esgotamento de solvente, e analisado por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas de alta resolução. Para determinação do potencial antiproliferativo utilizou-se linhagens de células tumorais humanas: AGS (adenocarcinoma gástrico), Caco-2 (adenocarcinoma colorretal), McF-7 (adenocarcinoma de mama), NCI-H460 (carcinoma pulmonar) e a linhagem celular não tumoral VERO. A atividade inibidora da produção de óxido nítrico (NO) e antioxidante celular (AAC) foram executadas em culturas de macrófagos de camundongo (RAW 264.7). Também foram determinados os teores de fenóis totais (FT), flavonoides totais e o fator de proteção solar (FPS). Também foram determinadas as atividades antioxidantes pelos métodos de sequestro do radical 2,2-difenil-1-picril-hidrazil (DPPH) e pelo poder antioxidante de Redução do Ferro (FRAP). A análise química indicou a presença dos compostos fenólicos: ácido quínico (3,986 mg/g), ácido protocatecuico (0,663 mg/g). ácido cumarico (0,026 mg/g), ácido ferulico (0,042 mg/g). Ácido cafeico (0,017 mg/g) e o flavonoide quercetina (0,085 mg/g). Os EB das folhas apresentaram atividade inibidora da produção de óxido nítrico (IC50 46µg/mL). Quanto a atividade antiproliferativa, maior inibição do EB ocorreu sobre as linhagens NCI-H460 (GI50= 13,00 µg/mL), MCF-7 (GI50= 16,00 µg/mL), CaCo2 (GI50= 48,00 µg/mL) e AGS (91,00 µg/mL). O índice de seletividade (IS) dos EBs variou de 0,57 a 4,0. O EB evidenciou potencial antioxidante celular com 69% de inibição. A concentração necessária para inibir 50% do radical DPPH foi IC50 = 3,64 mg/mL, e o poder de redução do ferro (FRAP) foi de 2,19 µM de sulfato ferroso /mg do extrato. O teor de fenóis totais variou de 0,65 a 25,60 µg GAE/mg de EB; o teor de flavonoides variou de 472,00 a 507,79 µg GAE/mg; o fator de proteção solar (FPS) foi de 4,03 a 12,48 nas concentrações de 0,25 a 1,0 mg/mL de EB, respectivamente. Os resultados encontrados nesta pesquisa propõem novas biomoléculas obtidas das folhas da graviola, e os efeitos inibidores da produção de óxido nítrico, antioxidante, antiproliferativo e proteção solar destas biomoléculas vem de encontro com os objetivos do desenvolvimento sustentável (ODS 3), reforçando a importância no bem estar social, contribuindo com o meio científico proporcionando melhor qualidade de vida para a população em geral, atuando diretamente na saúde única.
Palavras-chave
Ácido Quínico. Flavonoides. FPS. Graviola. MCF-7. NCI-H460. Óxido nítrico.
Title
Pharmacological and phytochemical aspects of the extract obtained from the leaves of annona muricata
Abstract
This dissertation is divided into two chapters. Chapter 1 aimed to conduct a bibliographic review on the chemical, biological and pharmacological aspects of Annona muricata. The methodology consisted of conducting a bibliographic survey, using Google Scholar, Scielo and Science Direct as academic research sources. Specific descriptors were adopted, focusing on publications on “chemical composition”, “pharmacological activities”, “botanical analysis” and “biological” of Annona muricata. The results gathered provided the construction of the body of the work, constituting the historical and descriptive aspects of the species Annona muricata. Also, the botanical aspects as well as the scientific synonymy and geographic location of the species were described. The chemical, pharmacological aspects and use in traditional medicine were also addressed. Chapter 2 aimed to investigate the sun protection factor (SPF), antiproliferative, nitric oxide production inhibitory and antioxidant activities of the crude extract (CE) of Annona muricata leaves. The crude extracts were obtained by the dynamic maceration process with solvent depletion, and analyzed by high-performance liquid chromatography coupled to high-resolution mass spectrometry. To determine the antiproliferative potential, human tumor cell lines were used: AGS (gastric adenocarcinoma), Caco-2 (colorectal adenocarcinoma), McF-7 (breast adenocarcinoma), NCI-H460 (lung carcinoma) and the non-tumor cell line VERO. The nitric oxide (NO) production inhibitory and cellular antioxidant (CAA) activities were performed in mouse macrophage cultures (RAW 264.7). The total phenol (TF), total flavonoid and sun protection factor (SPF) contents were also determined. The antioxidant activities were also determined by the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical scavenging (DPPH) and iron reduction antioxidant power (FRAP) methods. The chemical analysis indicated the presence of the following phenolic compounds: quinic acid (3.986 mg/g), protocatechuic acid (0.663 mg/g), coumaric acid (0.026 mg/g), ferulic acid (0.042 mg/g), caffeic acid (0.017 mg/g) and the flavonoid quercetin (0.085 mg/g). The EB from the leaves showed nitric oxide production inhibitory activity (IC50 46 µg/mL). Regarding antiproliferative activity, the greatest inhibition of EB occurred on the NCI-H460 (GI50 = 13.00 µg/mL), MCF-7 (GI50 = 16.00 µg/mL), CaCo2 (GI50 = 48.00 µg/mL) and AGS (91.00 µg/mL) lines. The selectivity index (SI) of EBs ranged from 0.57 to 4.0. EB showed cellular antioxidant potential with 69% inhibition. The concentration required to inhibit 50% of the DPPH radical was IC50 = 3.64 mg/mL, and the iron reducing power (FRAP) was 2.19 µM of ferrous sulfate/mg of the extract. The total phenol content ranged from 0.65 to 25.60 µg GAE/mg of EB; the flavonoid content ranged from 472.00 to 507.79 µg GAE/mg; the sun protection factor (SPF) was 4.03 to 12.48 at concentrations of 0.25 to 1.0 mg/mL of EB, respectively. The results found in this research propose new biomolecules obtained from soursop leaves, and the inhibitory effects of nitric oxide production, antioxidant, antiproliferative and sun protection of these biomolecules meet the objectives of sustainable development (ODS 3), reinforcing the importance of social well-being, contributing to the scientific community by providing a better quality of life for the general population, acting directly on One Health.
Keywords
Quinic Acid. Flavonoids. SPF. Soursop. MCF-7. NCI-H460. Nitric oxide.