Atividades antioxidantes do extrato bruto e frações das folhas de Myrcianthes pungens

Mestrado em Biotecnologia Aplicada à Agricultura
Autor: Bruna Karen Cardoso
Orientador: Zilda Cristiani Gazim
Defendido em: 21/03/2015

Resumo

A Myrcianthes pungens, pertencente à família Myrtaceae, muito encontrada na região sul do Brasil, apresenta altos teores de compostos fenólicos em seus frutos e folhas. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi isolar, identificar e avaliar as atividades antioxidantes do extrato bruto das folhas (EBF) e frações da M. pungens. O EBF foi submetido a fracionamento em coluna cromatográfica (CC) utilizando como eluentes: diclorometano (FRDicl), acetato de etila (FRAcEt) e metanol (FRMet). A identificação das frações foi realizada em duas etapas: inicialmente foi feita uma triagem fitoquímica em placa cromatográfica utilizando os métodos de precipitação com sais de ferro para investigação de taninos, as reações de cloreto de alumínio para flavonóides e a reação de Liebermann-Burchard para triterpenóides, e confirmada pela análise por Ressonância Magnética Nuclear (RMN) e espectrofotometria no ultra violeta visível (UV-Vis). A atividade antioxidante foi realizada pelos métodos de sequestro de radicais livres 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH), pelo sistema modelo de co-oxidação β-Caroteno/ácido linoleico, e determinado o teor de fenóis totais (FT). Os resultados da triagem fitoquímica indicaram a presença de triterpenos nas FRDicl e FRAcEt com aparecimento de manchas púrpuras na placa cromatográfica, sendo estes confirmados pelos espectros de RMN indicando a presença de triterpenos pentacíclicos na FRAcEt e identificados como α e β-amirina na FRDicl. A triagem fitoquímica indicou na FRMet a presença de taninos hidrolisáveis com o aparecimento de manchas azuis escuras e flavonóides com surgimento de fluorescência. Os taninos foram confirmados por RMN com espectro indicando a presença de unidades de galoil e β-glicose, e complementado por UV-Vis com absorção máxima de 279 nm. Os resultados da atividade antioxidante evidenciaram que a FRMet apresentou maior atividade pelo método DPPH com IC50(0,32 mg mL-1). O EBF apresentou maior teor de FT (1030,18 mg mL-1). As EBF e as FRDicl e FRMet apresentaram alta atividade antioxidante pelo sistema de co-oxidação β-caroteno/Ácido linoleico, com um potencial de inibição da oxidação de (89; 96 e 93%), e IC50 (0.18; 0.27 e 0.15), respectivamente. O Brasil possui uma grande variedade de plantas nativas ainda pouco exploradas economicamente e, o alto potencial antioxidante encontrado nas folhas do guabijú indicam a necessidade de avaliar esta propriedade como aplicação sustentável nos setores alimentícios, farmacêuticos e cosméticos.

Palavras-chave

Guabiju. β-caroteno/Ácido Linoleico. DPPH. Fenóis totais. Triterpenos pentacíclicos. α e β-amirina. Taninos.

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Title

ANTIOXIDANTACTIVITY OF THE EXTRACT AND ITS FRACTIONS FROM Myrcianthes pungens LEAVES

Abstract

Abstract: Myrcianthes pungens, belongs to Myrtaceae family, and is well spread in Brazil south, it shows high levels of phenolic compounds in its leaves and fruits. This work aimed to isolate, identify and evaluate antioxidants activities from crude extract (CE) and fractions from M. pungens leaves. CE was put under fractioning in chromatography column (CC) using as eluents dichloromethane (FRDicl), ethyl acetate (FRAcEt) and methanol (FRMet). Fractions identification were performed in two steps: Initially was done a phytochemical screening using Iron oxide precipitation to tanine investigation, aluminium chloride reactions to flavonoids and Liebermann-Burchard reactions to triterpenoids, confirmed through Nuclear Magnetic Resonance (NMR) and spectrophotometry in the ultra violet visible (UV- Vis). Antioxidant activity was performed by the method of scavenging free radicals 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), and by β-carotene/linoleic acid co-oxidation system; was also determined the content of total phenol (TP). Results from phytochemical screening indicated the presence of triterpenes in the fractions FRDicl and FRAcEt through purples spots in chromatographic papers, which were confirmed by NMR spectrum indicating the presence of pentacyclic triterpenes in FRAcEt fractions and identified as α and β-amyrin in FRDicl. Phytochemical screening indicated in FRMet fraction the presence of hydrolysable tanines with the presence of dark blue spots and flavonoids with fluorescence. Tanines were confirmed by NMR indicating the presence of galoil and β-glucose, they were supplemented by UV – Vis with maximum absorption of 279 nm. Results from antioxidant activity highlighted that FRMet showed the highest activity by DPPH method with IC50 (0,32 mg mL-1). CE had the highest level of FT (1030,18 mg mL-1). CE and FRDicl, FRMet showed a higher antioxidant activity by by β-carotene/linoleic acid co-oxidation system, inhibiting oxidation (89; 96 e 93%), and IC50 (0.18; 0.27 e 0.15), respectively. Brazil has a vast variety of native plants, which are few economically exploited, the high potential found in Guabijú leaves indicates the need of evaluating this property with sustainable application in food, drugs and cosmetic sectors.

Keywords

Guabiju. β-carotene/linoleic. DPPH. Total Phenol. Pentacyclic Triterpenes. α and β-amyrin. Tanines.