Avaliação da ação do extrato aquoso da polpa do jatobá (Hymenaea stigonocarpa) na viabilidade do sêmen bovino pós-congelamento

Mestrado em Ciência Animal com Ênfase em Produtos Bioativos
Autor: João Pedro Terra Prado Borges
Orientador: Ranulfo Piau Júnior
Defendido em: 27/08/2025

Resumo

A criopreservação de sêmen é uma das ferramentas da reprodução animal, sendo fundamental no cenário atual da pecuária. Apesar de sua capacidade de conservação, sabe-se que este processo também impacta negativamente a integridade dos espermatozoides, devido às mudanças drásticas de temperatura e manipulação, dessa forma o objetivo de pesquisas e inovações tecnológicas é minimizar tais impactos e conferir melhores condições de preservação. Com isso, são continuamente desenvolvidas formas de atenuar os efeitos prejudiciais da congelação e da degradação natural, como a formulação de diluentes crioprotetores. Este trabalho objetivou avaliar a capacidade do extrato aquoso de polpa de Jatobá (Hymenaea stigonocarpa) de conferir proteção antioxidante ao sêmen bovino, quando adicionado ao diluente comercial previamente ao processo de congelação. O estudo comparou de forma inédita a qualidade do sêmen congelado em diluente comercial Botubov® em sua fórmula padrão, com grupos contendo diferentes concentrações do extrato aquoso da polpa de Jatobá adicionado ao diluente. Foram utilizados 5 touros da raça Nelore, com idade média de 5 anos. Para o estudo foram obtidos dois ejaculados de cada um dos cinco touros, no intervalo de uma semana cada coleta, pelo método de eletroejaculação, totalizando dez partidas de sêmen criopreservadas. Os ejaculados foram divididos em 3 grupos: grupo controle (C): ejaculado diluído em meio comercial, grupo 1 ejaculado diluído em meio comercial acrescido com 0,5% de extrato aquoso da polpa do jatobá, grupo 2 ejaculado diluído em meio comercial acrescido com 1% de extrato aquoso da polpa do jatobá. As amostras foram diluídas numa concentração de 100 milhões/mL e posteriormente acondicionadas em palhetas de 0,5 mL. O congelamento das amostras teve início com o resfriamento, onde as palhetas foram mantidas por 4 horas a 5ºC e posteriormente, mantidas por 20 minutos em vapor de nitrogênio líquido (N2L) em caixa isotérmica e em seguida, mergulhadas em N2L e armazenadas em botijão criogênico. Para as análises pós-descongelação, as palhetas foram descongeladas a 36ºC por 20 segundos. Foram avaliados os parâmetros de cinética e cinemática espermática pelo sistema computadorizado (CASA - Computer-Assisted Semen Analisys). Com relação a cinética espermática da primeira coleta os resultados da motilidade total (%), motilidade progressiva (%), motilidade rápida foram estatisticamente superiores no grupo controle em relação ao grupo com 1% de extrato aquoso de polpa de jatobá e não diferiu do grupo com 0,5% de extrato. Não se observou diferença significativa entre os grupos na motilidade lenta (%), motilidade circular (%) e motilidade local (%). Os espermatozoides imóveis foram menores no grupo controle quando comparado com o grupo com 1% de extrato. Na segunda coleta não se observou diferenças significativas entre os grupos com relação às motilidades: total, progressiva, rápida, lenta e local A motilidade circular foi maior no grupo controle e os espermatozoides imóveis foram menores no grupo com 1% de extrato de jatobá. Com relação a cinemática espermática da primeira e segunda coleta não se observou diferenças significativas entre os grupos. Contudo, o presente estudo revelou que a adição da polpa de extrato de jatobá a 0,5 e 1% não melhorou os parâmetros de cinética espermática. O extrato de jatobá a 1% diminuiu os valores de motilidade total progressiva, motilidade rápida e aumento do percentual de espermatozoides imóveis. Ressalta-se, no entanto, a necessidade de novos estudos utilizando novas concentrações do extrato, novos métodos de integração e diluentes diferentes.

Palavras-chave

Bioativos. Criopreservação. Extrato vegetal. Reprodução animal.

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Title

Evaluation of the action of the aqueous extract of jatobá pulp (Hymenaea stigonocarpa) on the viability of post-freezing bovine semen.

Abstract

Semen cryopreservation is one of the tools used in animal reproduction and is essential in the current livestock industry. Despite its preservation capabilities, this process also negatively impacts sperm integrity due to drastic changes in temperature and handling. Therefore, research and technological innovations aim to minimize these impacts and provide better preservation conditions. Therefore, new approaches to mitigate the harmful effects of freezing and natural degradation are continually being developed, such as the formulation of cryoprotective extenders. This study aimed to evaluate the ability of aqueous extract of Jatobá pulp (Hymenaea stigonocarpa) to provide antioxidant protection to bovine semen when added to a commercial extender prior to the freezing process. The study compared, for the first time ever, the quality of semen frozen in Botubov® commercial extender, using its standard formula, with groups containing different concentrations of aqueous extract of Jatobá pulp added to the extender. Five Nelore bulls with an average age of 5 years were used. Two ejaculates from each of the five bulls were obtained one week apart by electroejaculation, totaling ten cryopreserved semen batches. The ejaculates were divided into three groups: control group (C): ejaculate diluted in commercial medium; group 1: ejaculate diluted in commercial medium supplemented with 0.5% aqueous extract of jatobá pulp; and group 2: ejaculate diluted in commercial medium supplemented with 1% aqueous extract of jatobá pulp. The samples were diluted to a concentration of 100 million/mL and subsequently stored in 0.5 mL straws. Sample freezing began with cooling, where the straws were kept for 4 hours at 5°C and subsequently kept for 20 minutes in liquid nitrogen vapor (N2L) in an isothermal box, then immersed in N2L and stored in a cryogenic cylinder. For post-thawing analyses, the straws were thawed at 36°C for 20 seconds. Sperm kinetics and kinematics parameters were evaluated by the computerized system (CASA - Computer-Assisted Semen Analysis). Regarding sperm kinetics of the first collection, the results of total motility (%), progressive motility (%), and fast motility were statistically higher in the control group compared to the group with 1% aqueous extract of jatobá pulp and did not differ from the group with 0.5% extract. No significant differences were observed between the groups in slow motility (%), circular motility (%), and local motility (%). Nonmotile sperm were smaller in the control group compared with the 1% extract group. In the second collection, no significant differences were observed between the groups regarding total, progressive, rapid, slow, and local motility. Circular motility was greater in the control group, and nonmotile sperm were smaller in the 1% jatobá extract group. Regarding sperm kinematics, no significant differences were observed between the groups in the first and second collections. The present study revealed that the addition of 0.5% and 1% jatobá extract pulp did not improve sperm kinetic parameters. The 1% jatobá extract decreased total progressive motility, rapid motility, and increased the percentage of nonmotile sperm. However, the need for further studies using new extract concentrations, new integration methods, and different diluents is emphasized.

Keywords

Animal Reproduction. Bioactive. Cytoprotective. Plant extract.