Avaliação morfométrica ovariana e recuperação de complexos Cumulus oophorus de cadelas submetidas a ovário-salpingo-histerectomia em diferentes fases do ciclo estral
Mestrado em Ciência Animal com Ênfase em Produtos Bioativos
Autor: Luiz Carlos Binsfeld
Orientador: Luciana da Silva Leal
Defendido em: 31/05/2013
A relação do ser humano com os animais de estimação apresentou uma grande transformação nas últimas décadas, tornando a criação de cães lucrativa e aumentando o interesse no emprego das biotécnicas da reprodução. A produção in vitro de embriões caninos ainda apresenta resultados insatisfatórios, principalmente na etapa de maturação dos ovócitos in vitro (MIV). Isso se deve às particularidades da fisiologia reprodutiva da cadela, incluindo as diferentes fases do ciclo estral que interferem nos resultados de MIV. Os objetivos do presente trabalho foram: avaliar a coloração (amarelada ou rosada), forma (alongada, arredondada ou ovalada), consistência, peso (g), comprimento (mm), largura (mm) e altura (mm) do ovário de cadelas; estudar a quantidade e a qualidade dos Complexos Cumulus oophorus (CCOs) recuperados; mensurar a concentração plasmática de progesterona (P4) para determinar a fase do ciclo estral em que a cadela estava no momento da recuperação dos ovários e correlacionar a fase do ciclo estral com os dados recuperados no experimento. Ao todo, foram avaliados os ovários de 55 cadelas submetidas à técnica de ovário-salpingo-histerectomia eletiva. Para as mensurações das dimensões ovarianas e peso dos ovários foram utilizados paquímetro e balança digitais, respectivamente. Para a avaliação da concentração plasmática de P4 se empregou a técnica de radioimunoensaio. A recuperação dos CCOs foi realizada por fatiamento e escarificação dos ovários, enquanto que a classificação dos mesmos foi realizada por avaliação em estereomicroscópios (aumento 40x). Com relação à avaliação morfofisiométrica dos ovários, 100% apresentaram coloração rósea; 96,36% formato oval e 3,64% formato redondo; 94,55% tinham consistência fibroelástica e 5,45% consistência flácida. O peso médio ± desvio-padrão dos ovários foi de 0,58 ± 0,63 g. Já as medidas médias ± desvio-padrão de comprimento, largura e altura foram, respectivamente, de: 13,41 ± 3,72; 7,81 ± 2,33 e 6,46 ± 2,00 mm. O número médio de corpos lúteos observados foi de 3,62 ± 3,65. No total foram recuperados 1642 CCOs, cuja média e desvio-padrão por animal foram de 29,85 ± 31,13; dentre estes 58,16% foram classificados como grau 1; 26,19% grau 2; 3,78% grau 3 e 11,88% expandido. Nas condições experimentais do presente estudo, pode-se concluir que o peso corporal influencia no peso e tamanho ovarianos; a idade da fêmea e a fase do ciclo estral não apresentam efeito no número total e na qualidade dos CCOs recuperados.
Ciclo estral. Ovócito. Ovário. Progesterona.
Ovarian morphometric evaluation and recovery of *Cumulus-Oocyte* complexes of bitches submitted to ovarian-histerectomy in diferente phases of estrous cycle
The relationship of humans with pets had an important transformation in recent decades, making the dog breeding a lucrative business and increasing the interest in the use of reproductive biotechnologies. In vitro production of canine embryos still has unsatisfactory results, particularly at the stage of in vitro maturation of oocyte (IVM). This is due to the peculiarities of the reproductive physiology of the female dog, including the different phases of the estrous cycle that interfere with the results of IVM. The objectives of this study were to evaluate the color (yellow or pink), format (elongated, round or oval), consistency, weight (g), length (mm), width (mm) and height (mm) of the canine ovary; study the quantity and quality of Cumulus-oocyte Complexes (COCs) recovered; measure plasma progesterone (P4) concentration to determine the stage of the estrous cycle at the time of ovarian recovery and to correlate the phase of the estrous cycle with the data recovered in the experiment. In total, were evaluated 55 ovaries of bitches submitted to elective surgery for ovarian-hysterectomy. For measurements of ovarian size and weight was used digital paquimeter and balance, respectively. To evaluate the plasma P4 concentration was employed the radioimmunoassay. The recovery of COCs was accomplished by slicing and scarification of ovary, while classifying of COCs was performed by stereomicroscopes (40 x). About morphophysiometric study of ovaries, 100% were pinkish; 96.36% had oval and 3.64% round shape, 94.55% had fibroelastic and 5.45% had flaccid consistency. The average weight ± standard deviation of the ovaries was 0.58 ± 0.63 g. The mean measurements ± standard deviation of length, width and height were, respectively: 13.41 ± 3.72, 7.81 ± 2.33 and 6.46 ± 2.00 mm. The average number of corpus luteum was observed was 3.62 ± 3.65. A total of 1642 COCs were recovered, with a mean and standard deviation were 29.85 ± 31.13; among them 58.16% were classified as grade 1, 26.19% grade 2, 3.78% grade 3 and 11.88% expanded. Under the experimental conditions of this study, it can be concluded that the body weight influences the ovarian weight and size; the female's age and stage of the estrous cycle have no effect in the total number and quality of COCs recovered.
Estrous cycle. Oocyte. Ovary. Progesterone.