Pesquisa
Composição do meio e filmes coloridos no desenvolvimento e anatomia de curcuma longa cultivada in vitro
Mestrado em Biotecnologia Aplicada à Agricultura
Autor: Meire Pereira de Souza Ferrari
Orientador: Hélida Mara Magalhães
Defendido em: 15/12/2015
Resumo
Curcuma longa é uma espécie de origem asiática utilizada para fins ornamentais, medicinais e alimentícios. No entanto, o método de propagação convencional é dispendioso e pouco eficiente. Sendo assim, objetivou-se com esse trabalho verificar métodos adequados de assepsia para brotações oriundas de rizomas, avaliar as concentrações de carvão ativado e sacarose, verificar concentrações de sais do meio MS e avaliar diferentes filmes espectrais no desenvolvimento e na anatomia de plântulas de C. longa cultivadas in vitro. O experimento foi conduzido nos laboratórios de biologia molecular e cultura de tecidos da UNIPAR, campus sede – Umuarama PR. Para tanto, quatro ensaios foram conduzidos de forma independente. O primeiro avaliou métodos de assepsia para os explantes, o segundo concentrações de sacarose e carvão ativado e terceiro, concentrações de sais e o ultimo diferentes filmes espectrais. Em todos os ensaios o meio utilizado foi o MS suplementado com 30 g/L de sacarose; 6,5 g/L de ágar e pH ajustado para 5,8. Foram acrescidos ao meio de cultura dois reguladores de crescimento 4,44 μM/L de BAP e 1,08 μM/L de ANA. Os dados obtidos foram submetidos análise de variância (ANOVA) a (p≤0,05) de probabilidade. E as médias comparadas pelo teste Tukey a (p≤0,05) de probabilidade. Para análise anatômica as médias foram comparadas pelo teste Scott-Knott a (p≤0,05) de probabilidade. Os métodos de assepsia avaliados foram todos similares, apresentando o mesmo efeito. A melhor concentração de sacarose foi obtida utilizando-se 60g/L, no entanto, recomenda-se o uso de carvão ativado até no máximo 4,5 g/L. Para concentrações de sais as médias foram comparadas pela regressão polinomial a (p≤0,05) de probabilidade, em 50 a 60% do meio MS propiciaram maiores comprimento do sistema radicular , quantidade de brotações e número de folhas. A dose usual de 3% de sacarose propiciou um menor desenvolvimento das plântulas in vitro e concentrações maiores que 60% de sais foram tóxicas aos tecidos de C. longa e como consequência comprometeram o sistema radicular e a parte aérea das plântulas em desenvolvimento. O diâmetro da base, a massa seca e fresca da parte área e raiz foram influenciadas pelas diferentes faixas espectrais sendo de modo geral os filmes amarelo e branco os que propiciaram maiores médias para essas características. Os tecidos, parênquima, floema, xilema e epiderme tanto da raiz como folha analisados na fase da implantação do experimento apresentaram-se todos diferenciados e visualmente não foram notadas diferenças e função dos tratamentos, no entanto, quantitativamente, os tecidos mostraram respostas variadas em função das faixas espectrais e épocas analisadas. Nas folhas de modo geral as faixas espectrais não propiciaram diferença no parênquima. Na epiderme as luzes amarelas e azuis foram mais efetivas. Na raiz a epiderme o tecido mais estável nas três épocas analisadas, sendo que os demais mostraram respostas diferenciadas conforme a mudança na faixa espectral.
Palavras-chave
açafrão-da-terra, meio de cultura, micropropagação, filmes coloridos, morfologia.
Title
COMPOSITION OF THE MIDDLE AND MOVIES IN COLOR AND DEVELOPMENT Curcuma longa ANATOMY GROWN IN VITRO
Abstract
Curcuma longa is a species from Asian origin used for ornamental, medicinal and food purposes. However, the conventional propagation method is costly and inefficient. Thus, the aim of this work is to verify proper aseptic methods to shoots arising from rhizomes, to evaluate the activated carbon concentrations and sucrose, to verify MS culture medium concentrations and to evaluate different spectral films in development and anatomy of Curcuma longa seedlings cultivated in vitro. The experiment was in the laboratories of molecular biology and tissue culture of UNIPAR, headquarters campus Umuarama Pr. To this end, four tests were conducted independently. The first evaluated aseptic methods for the explants, the second sucrose concentrations and activated charcoal and third, salt concentration and the last one different spectral beans. In all experiments the medium used was MS supplemented with 30 g/L sucrose; 6.5 g/l agar and pH adjusted to 5.8. They were added to the culture medium two growth regulators 4.44 uM/l BAP and 1.08 uM/L NAA. The data were submitted analysis of variance (ANOVA) to (p ≤ 0.05) probability. And the averages compared by Tukey test at (p ≤ 0.05) probability. For anatomical analysis averages were compared by Scott-Knott test (p ≤ 0.05) probability. The aseptic methods evaluated were all similar with the same effect. The optimal concentration of sucrose was obtained using 60 g/L, however, it recommends the use of activated carbon to a maximum of 4.5 g/L. For salt concentrations the averages were compared by the polynomial regression (p = 0.05) probability in 50-60% MS leads to the greatest length of the root system, number of shoots and number of leaves. The usual dose of 3% of sucrose provided a less development of seedlings in vitro and concentrations greater than 60% salts were toxic to C. longa tissue and consequently compromised the root system and shoots of seedlings developing. The diameter of the base, dry and fresh weight of root area and were influenced by the different spectral beans, which are the yellow and white light beans that provided the highest average for these characteristics. The tissue parenchyma , phloem , xylem and the epidermis both root and leaf analyzed at the stage of experiment implementation presented are all different and visually were not observed differences among the treatments, however, quantitatively, the tissues showed different responses depending on spectral films and used times. In general, the spectral beans did not promote difference in the parenchyma in the leaves. In the epidermis, yellow and blue lights were more effective. In the root epidermis as stable tissue in three seasons analyzed and the others showed different responses according to the change in the spectral range.
Keywords
turmeric, medium, micropropagation, color film, morphology.