Pesquisa
Detecção de neurônios do plexo mioentérico, perfil glicêmico e lipídico em ratos expostos aos fatores de risco diabetes, tabagismo e dislipidemia tratados com carqueja.
Mestrado em Ciência Animal com Ênfase em Produtos Bioativos
Autor: Paula Montanhini Favetta
Orientador: Ricardo de Melo Germano
Defendido em: 14/02/2020
Resumo
A hiperglicemia gerada pelo diabetes mellitus promove alterações fisiológicas em todo o organismo, sendo recorrente o aparecimento de distúrbios gastrintestinais nos portadores desta doença, devido ao dano ao plexo mioentérico. Além do diabetes, sabe-se que há uma relação entre o uso do tabaco e dislipidemia no sistema digestório, porém, ainda há uma lacuna no conhecimento sobre possíveis alterações nos neurônios entéricos. Algumas plantas medicinais são apontadas como terapias complementares no tratamento de doenças gastrointestinais, dentre elas, a Baccharis trimera, que possui em sua composição antioxidantes, que podem exercer efeito neuroprotetor nos neurônios do plexo mioentérico. O objetivo do presente estudo foi avaliar o possível efeito protetor da B. trimera, popularmente conhecida como carqueja, sobre os neurônios mioentéricos, perfil lipídico e glicêmico de ratos expostos ao modelo experimental com a indução do diabetes mellitus, dislipidemia e o tabagismo. Ratos machos, Wistar, com 90 dias, foram divididos em cinco grupos (n=5), (C-) animais normoglicêmicos, não dislipidêmicos e não tabagistas tratados com veículo (água filtrada), (C+) diabético, dislipidêmico e tabagista tratados com veículo (água filtrada) e animais diabéticos, dislipidêmicos e tabagistas tratados com diferentes doses de carqueja (BT30mg/kg, BT100mg/kg e BT300mg/kg). A indução do diabetes foi realizada via intraperitoneal, com 60mg/kg de estreptozotocina, a dislipidemia, pela adição de 0,5% de colesterol em ração comercial e posteriormente, expostos a inalação de fumaça de nove cigarros comerciais, uma vez por dia, cinco dias por semana, durante quatro semanas. Após 2 semanas, iniciou-se o tratamento com diferentes doses da fração solúvel em etanol de carqueja, via oral por gavagem, uma vez ao dia, por duas semanas em diferentes doses. Foi coletado sangue do plexo ocular dos animais para posteriormente verificar os níveis plasmáticos de colesterol e triglicerídeos. No intuito de quantificar a população de neurônios mioentéricos, foram realizadas as técnicas de coloração básica Giemsa, a fim de marcar a população total e a histoquímica da NADPH-diaforase, que permitiu quantificar os neurônios da subpopulação inibitória. Os animais dos grupos tratados com as diferentes doses de carqueja e C+ apresentaram redução de peso significativa. Na dose de 30mg/kg os níveis plasmáticos de colesterol e triglicerídeos foram reduzidos, porém, não houve redução da glicemia nos ratos tratados com B. trimera. Não foi observada redução neuronal significativa entre os neurônios nitrérgicos, identificados pela técnica NADPH-diaforase, contudo, pelo método de Giemsa, foi observada redução do número de neurônios, dos grupos controle positivo (C+) e os grupos tratados com carqueja (BT30, BT100 e BT300), em relação ao grupo controle negativo (C-), o que pode ter sido agravado pela inclusão do tabagismo ou da dieta hipercolesterolêmica. Assim pode-se concluir que na dose de 30mg/kg de carqueja houve redução significativa nos níveis plasmáticos de colesterol e triglicerídeos, contudo, não foi encontrada redução glicêmica em nenhum dos tratamentos. Quanto aos neurônios mioentéricos a carqueja não apresentou efeitos protetores com redução significativa na quantificação da população total, e a manutenção da subpopulação nitrérgica em todos os grupos, nos permite sugerir que estes neurônios são mais resistentes aos efeitos deletérios do diabetes, tabagismo e dieta hipercolesterolêmica.
Palavras-chave
Baccharis trimera. Cigarro. Dislipidemia. Hiperglicemia. Jejuno. Neurônios mioentéricos.
Title
Detection of myenteric plexus neurons, glycemic and lipid profile in rats exposed to risk factors diabetes, smoking and dyslipidemia treated with carqueja.
Abstract
The hyperglycemia generated by diabetes mellitus promotes physiological changes throughout the body, with the appearance of gastrointestinal disorders in patients with this disease recurring, due to damage to the myenteric plexus. In addition to diabetes, it is known that there is a relationship between tobacco use and dyslipidemia in the digestive system, however, there is still a gap in knowledge about possible changes in enteric neurons. Some medicinal plants are considered as complementary therapies in the treatment of gastrointestinal diseases, among them, Baccharis trimera, which has antioxidants in its composition, which can exert a neuroprotective effect on neurons in the myenteric plexus. The aim of the present study was to evaluate the possible protective effect of B. trimera, popularly known as gorse, on the myenteric neurons, lipid and glycemic profile of rats exposed to the experimental model with the induction of diabetes mellitus, dyslipidemia and smoking. Male, 90-day-old Wistar rats were divided into five groups (n=5), (C-) normoglycemic, non-dyslipidemic and non-smoking animals treated with vehicle (filtered water), (C+) diabetic, dyslipidemic and smoking treated with vehicle (filtered water) and diabetic, dyslipidemic animals and smokers treated with different doses of gorse (BT30mg/ kg, BT100mg/kg and BT300mg/kg). Diabetes induction was performed intraperitoneally, with 60mg/kg of streptozotocin, dyslipidemia, by the addition of 0.5% cholesterol in commercial ration and later, exposed to smoke inhalation of nine commercial cigarettes, once a day, five days a week for four weeks. After 2 weeks, treatment with different doses of the fraction soluble in gorse ethanol was started, orally by gavage, once a day, for two weeks in different doses. Blood was collected from the animals' ocular plexus to later check plasma levels of cholesterol and triglycerides. In order to quantify the population of myenteric neurons, basic Giemsa staining techniques were performed in order to mark the total population and the histochemistry of NADPH-diaphorase, which allowed quantifying the neurons of the inhibitory subpopulation. The animals in the groups treated with different doses of carqueja and C + showed significant weight reduction. At a dose of 30mg / kg, plasma levels of cholesterol and triglycerides were reduced, however, there was no reduction in blood glucose in rats treated with B. trimera. No significant neuronal reduction was observed between nitrergic neurons, identified by the NADPH-diaphorase technique, however, using the Giemsa method, a reduction in the number of neurons was observed in the positive control groups (C+) and the groups treated with gorse (BT30, BT100 and BT300), in relation to the negative control group (C-), which may have been aggravated by the inclusion of smoking or the hypercholesterolemic diet. Thus, it can be concluded that at the dose of 30mg/kg of gorse there was a significant reduction in plasma cholesterol and triglyceride levels, however, no glycemic reduction was found in any of the treatments. As for myenteric neurons, gorse did not present protective effects with significant reduction in the quantification of the total population, and the maintenance of the nitrergic subpopulation in all groups, allows us to suggest that these neurons are more resistant to the deleterious effects of diabetes, smoking and a hypercholesterolemic diet.
Keywords
Baccharis trimera. Cigarette. Dyslipidemia. Hyperglycemia. Jejunum. Myenteric neurons.