Estudo comparativo entre o método hematocitométrico e a espectrofotometria para a mensuração da concentração espermática de touros jovens da raça nelore

Mestrado em Ciência Animal com Ênfase em Produtos Bioativos
Autor: Cléber Cardeal
Orientador: Leonardo Franco Martins
Defendido em: 14/02/2014

Resumo

A concentração espermática representa o número de espermatozoides em um determinado volume. Existem diversas formas de se determinar a concentração espermática nos ejaculados, dentre elas a determinação indireta por meio da determinação da densidade (densitometria) ou da absorção de luz (fotometria) e métodos diretos, como o método hematocitométrico utilizando a Câmara de Neubauer. A determinação da concentração pela câmara de Neubauer é um método direto de contagem de células, e o mais confiável, no entanto não é tão utilizada nas centrais de inseminação, por ser um processo demorado, tornando-se menos prático quando a quantidade de ejaculados a serem processados for muito grande. O espectrofotômetro é um aparelho que mede a concentração espermática através da densidade óptica, tendo como principais vantagens a sua praticidade e rapidez. O objetivo deste trabalho foi comparar os resultados entre os avaliadores no método hematocitométrico e o espectrofotômetro na mensuração da concentração espermática de touros jovens da raça Nelore. Foram coletados pelo método de eletroejaculação 73 ejaculados de 20 touros jovens da raça Nelore com idade variando entre 18 a 22 meses, com bom escore corporal, criados em condição de pastagem, predominantemente de capim Brachiaria decumbens. Os animais foram submetidos a exame andrológico para a avaliação da aptidão reprodutiva, segundo os critérios preconizados pelo Colégio Brasileiro de Reprodução Animal. Após coleta e posterior preparação das amostras, os mesmos foram analisados por três técnicos pelo o método hematocitométrico e mensurados no espectrofotômetro em comprimento de onda de 550nm. Não foram detectadas diferenças nos resultados da mensuração da concentração espermática por mL entre os avaliadores mensurando pelo método hematocitométrico e o espectrofotômetro (p>0,05). A correlação intraclasse comparando as avaliações dos avaliadores pelo método hematocitométrico e o espectrofotômetro foi elevada (0,9), demonstrando que as leituras foram semelhantes entre si, com uma alta replicabilidade entre as mensurações dos avaliadores. Com os resultados do presente experimento pode se afirmar que a mensuração realizada pelo espectrofotômetro é confiável podendo vir a substituir o método hematocitométrico para a realização da mensuração de concentração espermática em touros jovens da raça Nelore, melhorando e padronizando as técnicas utilizadas em laboratórios de andrologia.

Palavras-chave

Absorbância. Andrologia. Bos indicus. Bovinos. Câmara de Neubauer. Sêmen.

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Title

Comparative study between haemocytometer method and the use of spectrophotometry for the measurement of sperm concentration of young Nellore bulls

Abstract

The sperm concentration is the physical aspects of the ejaculated semen and represents the number of sperm per millimeter (mm3) or cubic centimeter (cm3 =mL). There are several ways to determine the sperm concentration in ejaculates, among them the indirect determination from the appearance of density (densitometry) or absorption of light (photometry) and direct methods such as the method haemocytometer (Neubauer chamber). Determination of concentration by a Neubauer chamber is a direct cell counting method, and more reliable, however, is not so used in the insemination centers, once the process is slow, making it less practical when the volume of ejaculate to be processed is very large. The spectrophotometer is a device that measures sperm concentration by optical density, the main advantages of its convenience and speed. The objective of this study was to compare the results between evaluators in haemocytometer spectrophotometer method and the measurement of sperm concentration of young Nellore bulls. Were collected by the method of electroejaculation 73 ejaculates of 20 Nelore bulls youth aged between 18 to 22 months , with good body score, created in pasture condition, predominantly of Brachiaria decumbens. The animals were subjected to examination for breeding soundness evaluation of reproductive fitness, according to the criteria established by the Brazilian College of Animal Reproduction. After collection and subsequent preparation of the samples, they were analyzed by three technicians and measured in a spectrophotometer at a wavelength of 550nm. No differences were found in the results of the measurement of sperm concentration per ml between evaluators by hematocitométrico measuring method and spectrophotometer (p > 0.05). The intraclass correlation was high (0.9), demonstrating that the readings were similar, with a high reproducibility between measurements of the evaluators. With the results of this experiment can be said that the measurement performed by spectrophotometer is reliable and may eventually replace the haemocytometer method for performing the measurement of sperm concentration in young Nellore bulls, improving and standardizing the techniques used in andrology laboratories. Keywords: Absorption. Andrology. Bos indicus. Bovine. Neubauer chamber. Semen.