Pesquisa
Perfil de resistência e atividade inibitória da Camellia sinensis frente a Staphylococcus spp. Isolados de lesões acneicas
Mestrado em Ciência Animal com Ênfase em Produtos Bioativos
Autor: Vanessa Rosaline Costa Oliveira
Orientador: Lisiane de Almeida Martins
Defendido em: 07/03/2018
Resumo
A acne é uma afecção presente na pele humana onde abriga várias bactérias nocivas, uma delas é o Staphylococcus aureus. Para o tratamento desta afecção são administrados fármacos antibióticos, mas com o uso indiscriminado deste medicamento as bactérias presentes na pele se tornaram resistentes sendo considerado um problema de saúde pública, assim aumentou-se a procura de estudos com novos compostos que apresenta atividade inibitória, onde os fitoterápicos destacam-se com um potencial promissor. A Camellia sinensis, mais conhecida como chá verde vem despertando interesse em sua atividade inibitória na substituição dos antibióticos para diminuição da resistência bacteriana. O presente estudo teve como objetivo mensurar a atividade inibitória de extrato de Camellia sinensis frente a estirpes de Staphylococcus spp. isolados de lesões acneicas. Foi realizado com os pacientes envolvidos no estudo o questionário epidemiológico, sendo os parâmetros perguntados para cada paciente: Sexo, Estado Civil, Profissão, Ovário Policistico, Mátodo Contraceptivo, Gestação, Tratamento Dematológico, Funcionamento Intestinal, Emocional, Filtro Solar, Grau de Acne, Efeito do Chá. O extrato de Camellia sinensis foi preparado com solução hidroalcoólica a 60%, após rotaevaporado a 45ºC. Foi realizada a análise do extrato por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas - (CG/EM). A seguir, realizada a atividade inibitória de cepas padrão de bactérias Gram positivas (Staphylococcus aureus ATCC 25923) e Gram negativas (Escherichia coli ATCC 25922), bem como para 04 amostras de isolados de lesões acneicas e posteriormente, foram feitas a atividade inibitória das 50 amostras dos isolados de lesões acneicas, em seguida foi realizado o antibiograma em um primeiro teste apenas com antibióticos e depois com o antibiótico em associação com a Camellia sinensis. A cromatografia detectou como compostos majoritários a cafeína; Ácido hexadecanóico, éster 1- (hidroximetil) -1,2-etanodiílico e 1-Monolinoleoilglicerol éter trimetilsilílico sendo este os compostos com atividade inibitória. Ao realizar o MIC para determinar a melhor concentração de atividade inibitória e posteriormente realizamos os antibiogramas a Concentração Inibitória Mínima foi de 18,75mg/mL, sendo possível determinar o MIC50 = 12,5 mg/mL e MIC90 = 17,49 mg/mL. Quanto ao perfil de resistência aos antimicrobianos, pode-se observar que houve resistência aos antibióticos: a sulfazotrim (95,5%), penicilina (90,9%), eritromicina (77,3%), ampicilina (77,3%) e azitromicina (59,1%), pois pode-se considerar que são cepas de Staphylococcus isoladas de pele acnéica de indivíduos aparentemente normais onde pode-se desperta uma grande preocupação com estes pacientes pois podem carrear bactérias de alto potencial a infecções oportunistas, onde pode acarretar alto risco a saúde pública. Com relação aos resultados do questionário foram: Sexo Feminino: 41 (82%), Sexo Masculino 9 (18%); Estado civil: Casada 3 (6%), Solteira 46 (92%), 1 (2%); Profissão: Estudante 38 (76%), Outros 12 (24%); Ovário Policístico: Não 30 (60%), Sim 10 (20%); Método Contraceptivo: Não 29 (58%), Preservativo 12 (24%); Gestação: Não 35 (70%), Sim 6 (12%); Tratamento Dermatológico: Não 46 (92%), 4 (8%); Funcionamento Intestinal: Normal: 39 (78%), Solto (2%), Preso: 10 (20%); Emocional: Ansiosa: 19 (38%), De bem com a vida: 15 (30%), Outros ou mais de uma: 16 (32%); Filtro solar: Não 27 (54%), Sim: 23 (46%); Grau de Acne: I (24 (48%), II 26 (52%); Efeito do Chá Verde: Sim 24 (48%) e Não 26 (52%). Pode-se concluir que a Camellia sinensis é uma planta que apresenta atividade inibitória aos isolados de lesões acneicas e é um fitofármaco promissor para amenizar as lesões acneicas da pele humana, sendo futuramente utilizado em produtos cosméticos.
Palavras-chave
Acne, Atividade inibitória. Camellia sinensis. Resistência bacteriana. Staphylococcus spp. Umuarama – PR.
Title
Profile of resistance and inhibitory activity of Camellia sinensis against Staphylococcus spp. isolated from acne lesions.
Abstract
Acne is a condition present in the human skin where it houses several harmful bacteria, one of them is Staphylococcus aureus. For the treatment of this condition antibiotics are administered, but with the indiscriminate use of this medicine the bacteria present in the skin became resistant being considered a public health problem, thus increased the search for studies with new compounds that shows inhibitory activity, where the phytotherapics stand out with a promising potential. Camellia sinensis, better known as green tea, has aroused interest in its inhibitory activity in the substitution of antibiotics for the reduction of bacterial resistance. The present study aimed to measure the inhibitory activity of Camellia sinensis extract against strains of Staphylococcus spp. isolated from acne lesions. It was performed with the patients involved in the study the epidemiological questionnaire, being the parameters asked for each patient: Sex, Marital Status, Profession, Polycystic Ovary, Contraceptive Method, Gestation, Dematological Treatment, Intestinal, Emotional, Effect of Tea. The extract of Camellia sinensis was prepared with 60% hydroalcoholic solution, after rotoevaporation at 45ºC. Analysis of the extract by gas chromatography coupled to mass spectrometry (CG / MS) was performed. The inhibitory activity of standard strains of Gram positive (Staphylococcus aureus ATCC 25923) and Gram negative bacteria (Escherichia coli ATCC 25922), as well as for 04 samples of isolates from acneic lesions, was then carried out and the inhibitory activity of the 50 samples of the isolates of acneic lesions, then the antibiogram was performed in a first test only with antibiotics and then with the antibiotic in combination with Camellia sinensis. Chromatography detected caffeine as major compounds; Hexadecanoic acid, 1- (hydroxymethyl) -1,2-ethanediyl ester and 1-Monolinoleoylglycerol trimethylsilyl ether, these being the compounds with inhibitory activity. When the MIC was used to determine the best inhibitory activity concentration and the antibiograms were performed, the Minimum Inhibitory Concentration was 18.75 mg / mL and it was possible to determine MIC50 = 12.5 mg / mL and MIC90 = 17.49 mg / mL . As for antimicrobial resistance, resistance to antibiotics was found: sulfazotrim (95.5%), penicillin (90.9%), erythromycin (77.3%), ampicillin (77.3%), and azithromycin (59.1%), since Staphylococcus strains isolated from the skin of apparently normal individuals can be considered as a major concern for these patients because they can carry high potential bacteria to opportunistic infections, where may pose a high risk to public health. Regarding the results of the questionnaire were: Female Sex: 41 (82%), Male Sex 9 (18%); Marital status: Married 3 (6%), Single 46 (92%), 1 (2%); Occupation: Student 38 (76%), Other 12 (24%); Polycystic ovary: No 30 (60%), Yes 10 (20%); Contraceptive method: No 29 (58%), Preservative 12 (24%); Gestation: No 35 (70%), Yes 6 (12%); Dermatological Treatment: No 46 (92%), 4 (8%); Intestinal Function: Normal: 39 (78%), Loose (2%), Imprisoned: 10 (20%); Emotional: Anxious: 19 (38%), Well with life: 15 (30%), Other or more than one: 16 (32%); Solar filter: No 27 (54%), Yes: 23 (46%); The effect of Green Tea: Yes 24 (48%) and No 26 (52%). It can be concluded that Camellia sinensis is a plant that presents an inhibitory activity to the isolates of acneic lesions and is a promising phytopharmaceutical to ameliorate the acneic lesions of the human skin, being used in the future in cosmetic products.
Keywords
Acne, Inhibitory activity. Camellia sinensis. Bacterial resistance. Staphylococcus spp. Umuarama - PR.