Pesquisa
Probióticos previnem o déficit de crescimento dos estratos da parede do cólon de ratos desnutridos pós-lactação
Mestrado em Ciência Animal com Ênfase em Produtos Bioativos
Autor: Dirlene Pereira de Lima
Orientador: Eduardo José de Almeida Araújo
Defendido em: 27/05/2010
Resumo
Os probióticos são definidos como suplemento microbiano vivo, que administrados em quantidade adequada, afetam de forma benéfica seu receptor, por meio da melhoria do balanço microbiano intestinal, conferindo benefícios à saúde. Vários estudos demonstram, que probióticos estimulam a proliferação de células do sistema imunológico associado à mucosa intestinal, fato que pode contribuir para o controle de infecções, assim como preveni-las no caso de doenças derivadas de carências nutricionais. Em função disso, objetivou-se analisar morfometricamente os estratos da parede do cólon de ratos desnutridos e suplementados com probióticos. Para tanto, utilizaram-se 16 ratos (Rattus norvegicus) Wistar, recém-desmamados (21 dias), os quais foram distribuídos em quatro grupos: animais que receberam a ração comercial (G1, n = 4); animais que receberam a mesma ração do grupo G1 e foram suplementados com probióticos (G2, n = 4); animais que receberam uma ração de com 4% de proteínas (G3, n = 4); animais que receberam a mesma ração do grupo G3 e foram suplementados com probióticos (G4, n = 4). A cultura probiótica utilizada foi a ABT-4 CHR. HANSEN contendo Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus; Streptococcus salivarius ssp. thermophilus; Bifidumbacterium bifidus e Lactobacillus acidhophillus. Após 12 semanas, os animais foram anestesiados visando laparotomia para remoção do cólon, o qual foi mensurado quanto ao seu comprimento e largura, objetivando calcular sua área. Anéis intestinais foram submetidos à rotina de processamento histológico. Cortes transversais de 3 µm foram corados com H.E. e técnicas histoquímicas para evidenciação de glicoconjugados: Periodic Acid Schifff (P.A.S.) + solução de diástase e Alcian Blue (A.B.) pH 2,5 e pH 1,0. Observou-se que os cólons coletados não tiveram suas dimensões (comprimento, largura e área) alteradas tanto pela desnutrição, assim como pela suplementação com probióticos. Os achados quanto à análise morfométrica da parede do cólon demonstraram que a altura dos enterócitos, bem como a profundidade das criptas intestinais reduziu nos animais do G3 quando comparados aos do G1 e houve um aumento desse parâmetro nos animais do G4 (p<0,05), tornando-se semelhantes aos do G1. A túnica mucosa teve déficit de crescimento nos animais desnutridos (G3) em relação ao G1, sendo menos intenso no G4, porém os animais do G2 apresentaram espessamento quando comparados aos normonutridos (G1). Além disso, os animais desnutridos (G3) apresentaram um déficit de ganho na espessura da tela submucosa de ~21,5%, em relação aos eutróficos (G1),sendo amenizado em ~72% nos suplementados com probióticos (G4). A túnica muscular obteve um déficit na espessura em animais desnutridos não suplementados (G3), já nos animais desnutridos e suplementados (G4) esse prejuízo não foi constatado. Como consequência da redução da espessura de todos os estratos da parede do cólon, observou-se nos animais desnutridos (G3) que a espessura total da parede teve um déficit de crescimento de ~7%, porém permaneceu inalterada nos ratos desnutridos suplementados com probióticos (G4), mesmo considerando a discreta redução da tela submucosa, que ocorreu nesses animais. No que tange ao número de células caliciformes em relação ao número de enterócitos observou-se que tanto a desnutrição como o consumo de probióticos não interferiram nessa proporção. Dessa forma, conclui-se que a suplementação com probióticos ABT-4 durante 12 semanas previne o déficit de crescimento dos estratos da parede do cólon, que normalmente ocorre em ratos desnutridos proteicamente após a lactação. Além disso, neste estudo não se observou alteração na proporção do número de células caliciformes em relação ao número de enterócitos nos ratos desnutridos, independentemente da suplementação com probióticos.
Palavras-chave
desnutrição; histologia; intestino grosso; morfometria; probióticos
Abstract
Probiotics are defined as a live microbial supplement that, in appropriate amounts, affects its receptor beneficially by improving the intestinal microbial balance and benefiting health. Several studies show that probiotics stimulate the proliferation of the immune system cells associated to the intestinal mucosa, which can contribute to control infections as well as prevent them in case of diseases due to nutritional deficiency. Because of that, the aim of this study is to analyze morphometrically the colon wall strata of malnourished rats supplemented with probiotics. Thus, 16 recently weaned (21 days) male Wistar rats (Rattus norvegicus) were distributed into four groups: animals that received commercial chow (G1, n = 4); animals that received the same feed as G1 and were supplemented with probiotics (G2, n = 4); animals that received chow with 4% of proteins (G3, n = 4); animals that received the same feed as G3 and were supplemented with probiotics (G4, n = 4). The utilized probiotic culture was ABT-4 CHR.HANSEN containing Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus; Streptococcus salivarius ssp. thermophilus; Bifidumbacterium bifidus and Lactobacillus acidhophillus. After 12 weeks, the animals were anesthetized for laparotomy in order to remove the colon that was measured for its length and width to calculate its area. Intestinal rings were submitted to the histological processing protocol. Three-µm transversal cuts were stained with H.E. and histochemical techniques to make glycoconjugates evident: Periodic Acid Schifff (P.A.S.) + diasthasis solution and Alcian Blue (A.B.) pH 2.5 and pH 1.0. It was observed that the collected colons did not have their dimensions (length, width and area) altered by the malnourishment and the supplementation with probiotics. The findings in the morphometric analysis of the colon wall demonstrated that the height of enterocytes as well as the depths of the intestinal crypts reduced in animals of G3 when compared to the ones of G1, and there was an increase of this parameter in animals of G4 (p<0.05), making them similar to the ones of G1. The mucosa had a growth deficit in malnourished animals (G3) in relation to G1, and it was less intense in G4. However, the animals of G2 presented thickening when compared to normonourished ones (G1). Besides, the malnourished animals (G3) presented a gain deficit in the submucosa thickness of ~21.5%, in relation to the eutrophic ones (G1) and were reduced in ~72% in supplemented with probiotics (G4). The external muscle had a thickness deficit in non-supplemented malnourished animals (G3) whereas supplemented malnourished animals (G4) did not present this deficit. The consequence of the thickness reduction in all colon wall strata was that the total thickness of the wall had a growth deficit of ~7% in malnourished animals (G3), but it was not altered in malnourished rats supplemented with probiotics (G4), even considering the discrete reduction of the submucosa that occurred in these animals. Regarding the number of globet cells in relation to the number of enterocytes, it was observed that the malnourishment as well as the intake of probiotics did not interfere in this proportion. Thus, it was concluded that the supplementation with ABT-4 probiotics for 12 weeks prevents the growth deficit of colon wall strata that normally occurs in protein malnourished rats right after lactation. Besides, this study did not observe any alteration in the proportion of the number of globet cells in relation to the number of enterocytes in malnourished rats, regardless of the supplementation with probiotics.
Keywords
large intestine; malnourishment; morphometry; probiotics