Pesquisa
Quantificação dos neurônios do plexo mientérico de morcegos da espécie Molossus rufus
Mestrado em Ciência Animal com Ênfase em Produtos Bioativos
Autor: Grazielli de Fátima Serenini
Orientador: Ricardo de Melo Germano
Defendido em: 15/02/2019
Resumo
Morcegos da espécie Molossus rufus tem hábito alimentar insetívoro o que lhe confere um importante papel na dinâmica biológica do controle de insetos. Características do tubo digestório são marcadas pelo hábito alimentar, elucidando, além das características já conhecidas, diferenças anatomorfohistológicas, podendo inclusive exercer efeitos sobre Sistema Nervoso Entérico (SNE). O SNE está presente ao longo de todo o tubo digestório, estando os neurônios dispostos em plexos, destacando-se dentre eles o plexo mientérico, que atua no controle da motricidade, exercendo assim, influência na absorção dos nutrientes. A organização e densidade dos neurônios mientéricos podem variar de acordo com a espécie animal bem como do segmento do tubo digestório considerado. O óxido nítrico (NO) é um dos principais neurotransmissores presentes nos neurônios mientéricos, atuando como mediador no relaxamento do músculo liso gastrointestinal, de modo que estes neurônios são evidenciados igualmente pela imunohistoquímica da óxido nítrico-sintase (NOS) ou pela histoquímica da NADPH-diaforase. Neste sentido, objetivou-se caracterizar quantitativamente a população neuronal total e subpopulação NADPH-d+ do plexo mientérico de M. rufus, visto que não há relatos sobre o SNE e dos seus plexos em morcegos. Foram coletados cinco espécimes de M. rufus em residência rural na microrregião de Cianorte-PR, região que configura-se como área de amortecimento da Reserva Biológica das Perobas, constituindo corredor ecológico para diversas espécies. Os animais foram transportados individualmente em sacos de algodão, visando minimizar o estresse. A eutanásia foi realizada em câmara saturada com isoflurano e, após confirmada a morte dos animais, foram coletados segmentos de intestino delgado, correspondentes ao jejuno, de igual tamanho, destinados à duas técnicas para marcação neuronal, Giemsa e NADPH-diaforase e, um terceiro fragmento foi destinado às técnicas histológicas de hematoxilina-eosina e tricômio de masson. Todos os procedimentos realizados foram aprovados pelo Comitê de Ética no Uso de Animais da Unipar (CEUA - protocolo n. 34347/2017) e pelo Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade (ICMBio - protocolo n. 60061-1). A partir da análise dos cortes histológicos, evidenciou-se a localização do plexo mientérico entre os estratos longitudinal e circular da túnica muscular. Neurônios Giemsa+ apresentaram uma média de 279,23 neurônios/mm2, já os neurônios nitrérgicos apresentaram em média à 20,40% da população neuronal mientérica total, sendo quantificados uma média de 58,14 neurônios NADPH-d+/mm2. Não há relatos sobre as características do SNE e do plexo mientérico de morcegos, o que impõe uma limitação quanto ao conhecimento completo da sua biologia, conferindo lacunas quanto à compreensão dos morcegos como indivíduos integrantes de um todo complexo, bem como limita possíveis inferências intraespecíficas e interespecíficas sobre os efeitos ambientais da atividade antrópica na sobrevivência destes animais. Os dados coletados mostram-se condizente com estudos anteriores em outras espécies de mamíferos quanto à localização do plexo mientérico bem como a proporção neuronal mientérica NADPH-d+ comparada com a população de neurônios Giemsa+.
Palavras-chave
Chiropteros. Molossídeos. Neurônios mientéricos. Neurôrios NADPH-diaforase. Sistema nervoso entérico. Tubo digestório.
Title
Quantification of neurons from myenteric plexus of the bats from species Molossus rufus
Abstract
Bats of the species Molossus rufus have an insectivorous feeding habit which gives it an important role in the biological dynamics of insect control. Characteristics from digestive tract are marked by the alimentary habit, elucidating, in addition to the known characteristics, anatomorphohistological differences, and may even exert effects on the Enteric Nervous System (ENS). The ENS is present throughout the entire digestive tract, with the neurons disposed in plexus, standing out among them the myenteric plexus, which acts on the motor control, exerting an influence on the absorption of nutrients. The organization and density of the myenteric neurons may vary according to the animal species as well as the segment of the digestive tube under consideration. Nitric oxide (NO) is one of the main neurotransmitters present in the myenteric neurons, acting as mediator in the relaxation of gastrointestinal smooth muscle, so that these neurons are also evidenced by the immunohistochemistry of nitric oxide synthase (NOS) or the histochemistry of NADPH-diaphorase. In this sense, we aimed to quantitatively characterize the total neuronal population and NADPH-d+ subpopulation of the myenteric plexus of M. rufus, since there are no reports on the ENS and its plexus in bats. Five specimens of M. rufus were collected in a rural residence in the Cianorte-PR microregion, a region that is a buffer zone of the Reserva Biológica das Perobas, constituting an ecological corridor for several species. The animals were individually transported in cotton bags in order to minimize stress. Euthanasia was performed in a chamber saturated with isoflurane, confirmed the death of the animals, small intestine segments of jejunum of equal size were collected for two techniques for neural marking, Giemsa and NADPH-diaphorase, and a third fragment was destined to the hematoxylin-eosin and masson trichrome histological techniques. All the procedures performed were approved by the Comitê de Ética no Uso de Animais da Unipar (CEUA - protocol n. 34347/2017) and by the Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade (ICMBio - protocol n. 60061-1). From the analysis of the histological sections, the location of the myenteric plexus between the longitudinal and circular layers from muscular tunica was evidenced. Giemsa+ neurons presented a mean of 279.23 neurons/mm2, whereas the nitrergic neurons presented on average to 20.40% of the total neuronal myenteric population, being quantified a mean of 58.14 neurons NADPH-d+/mm2. There are no reports on the characteristics of the ENS and the myenteric plexus of bats, which imposes a limitation on the complete knowledge of their biology, conferring gaps in the understanding of the bats as individuals integrating a complex whole as well as limiting intraspecific and interspecific inferences, on the environmental effects of anthropic activity on the survival of these animals. The data collected are consistent with previous studies in other mammals on the location of the myenteric plexus as well as the NADPH-d+ myenteric neuronal ratio compared to the population of Giemsa+ neurons.
Keywords
Chiroptera. Digestive tube. Enteric nervous system. Molossidae. Myenteric neurons. NADPH-diaphorase neurons.