Pesquisa
Toxicologia de segurança Vitex Megapotamica (spreng)
Doutorado em Ciência Animal com Enfase em Produtos Bioativos
Autor: Rita de Cassia Lima Ribeiro
Orientador: Emerson Luiz Botelho Lourenço
Defendido em: 18/12/2019
Resumo
Os Produtos Naturais e seus derivados bioativos possuem propriedades medicinais, e são usadas na terapia médica por pessoas no mundo todo. Reconhecidamente o Brasil possui um enorme potencial etnobotânico, devido à grande biodiversidade nativa em todo território brasileiro. Por este motivo as Políticas Públicas Nacionais resguardam o conhecimento popular e a matéria prima nativa da exploração destes recursos por outros interesses, mantendo-se no país, para que seja utilizado de forma sustentável. Além disso, o Sisgen (Sistema Nacional do Patrimônio Genético) resguarda atualmente a invasão de pesquisadores que fazem uso do bioma brasileiro sem o devido registro dos objetivos e derivações de suas pesquisas. Consequentemente, aumenta a possibilidade das elaborações de novos medicamentos a partir de compostos bioativos de plantas nativas por pesquisadores brasileiros. Desta forma, surge a necessidade de estudos pré-clínicos e testes toxicológicos que propiciem informações sobre a eficácia e segurança de seu uso, garantindo assim uma opção terapêutica de qualidade, sem perigo à saúde. No Paraná muitas plantas nativas possuem propriedades medicinais, e várias possuem seu emprego na medicina tradicional local, assim como a Tarumã. Esta planta do gênero Vitex e da espécie megapotamica (Spreng) Moldeke é utilizada na medicina tradicional como adjuvante na terapêutica de várias enfermidades. Sua indicação de uso popular abrange afecções reumáticas, distúrbios pulmonares. É considerada hipoglicemiante, hipocolesterolêmico, anti-inflamatória entre outras atividades. No entanto, os dados sobre o efeito da Vitex megapotamica descritos na literatura, são escassos no que diz respeito à utilização segura da planta. Neste contexto o presente trabalho realizou estudos genotoxicidade e toxicológico pré-clínico sobre o seu uso prolongado. Dessa forma, o objetivo desta pesquisa foi avaliar a toxicidade oral pré-clínica após doses repetidas do extrato bruto metanólico liofilizado obtido das folhas e talos em ratos wistar machos e fêmeas. Para os ensaios de genotoxicidade foram utilizados cinco grupos com oito ratos wistar em cada grupo, para isso, três doses do extrato da Vitex megapotamica nas doses (100, 300 e 900 mg/kg) ou controle negativo (água filtrada) administrados por via oral e ciclofosfamida Monohidratada controle positivo (20 mg/Kg-Sigma –Aldrich) administrado por via intraperitoneal após 24 horas. Ao termino foram coletado sangue total em tubo contendo Ácido Etilenodiamino Tetra-Acético (EDTA) para o teste Cometa e posteriormente os animais foram eutanasiados. Para o teste do Micronúcleo foram retirados os fêmures e coletado a medula óssea. Os dois ensaios demostraram que o extrato da Vitex megapotamica não induziu quaisquer sinal de genotoxicidade detectável, indicando que o extrato possui segurança. Para o estudo de toxicidade oral pré-clínica após doses repetidas do extrato bruto da Vitex megapotamica em ratos wistar machos e fêmeas. Foram utilizadas três doses do extrato (100, 300 e 900 mg/kg) ou controle negativo (água filtrada) administrados durante 90 dias por via oral. Os animais foram pesados semanalmente e sinais clínicos de toxicidade sistêmica foram analisados durante o tempo de tratamento. Um dia após o último tratamento com o extrato os animais foram eutanasiados. Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê de Ética e Pesquisa Envolvendo Experimentação Animal da UNIPAR. Foram coletadas amostras de sangue para análises hematológicas e bioquímicas, e órgãos para determinação do peso relativo, absoluto e histopatologia. Não foram observados sinais clínicos de intoxicações pelo extrato e nem morte destes animais. Na avaliação do ganho de peso corporal, parâmetros bioquímicos, hematológicos, peso relativo e absoluto e nas análises histopatológicas de rins, fígado e baço, coração, intestino e pâncreas também não foram encontradas diferenças estaticamente significativas. Os resultados obtidos mostraram ausência de toxicidade oral após doses repetidas com o extrato bruto da Vitex megapotamica. Desta forma, segundo os protocolos da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (Anvisa) e da Organização para a Cooperação e Desenvolvimento Economico (OCDE), no que se refere a ensaios toxicológicos, esta espécie vegetal na forma como foi proposto o referido design experimental, demonstrou ser segura. No entanto, mais ensaios em modelos de toxicologia reprodutiva e de teratologia devem ser realizados para que se possa caracterizar sua amplitude de segurança em qualquer período de exposição.
Palavras-chave
Tarumã, Toxicidade, Fitoterápico.
Title
Vitex Megapotamics (Spreng) Chronic Period Safety Toxicology
Abstract
Natural Products and their bioactive compounds have medicinal properties and are used in medical therapy by people worldwide. Admittedly, Brazil has enormous ethnobotanical potential, due to the great native biodiversity throughout the Brazilian territory. For this reason, National Public Policies safeguard popular knowledge and a native raw material from the exploitation of resources by other interests, remaining in the country, so that it can be used sustainably. In addition, the Sisgen (National Genetic Heritage System) currently invades researchers who make use of the Brazilian biome without record of objectives and research derivations. Consequently, it increases the possibility of developing new medicines from bioactive compounds from native plants for Brazilian researchers. This increases the need for preclinical studies and toxicology tests that provide information on the efficacy and safety of its use, thus allowing a quality therapeutic option without health hazard. Natural Products and their bioactive compounds have medicinal properties and are used in medical therapy by people worldwide. Admittedly, Brazil has enormous ethnobotanical potential, due to the great native biodiversity throughout the Brazilian territory. For this reason, National Public Policies safeguard popular knowledge and a native raw material from the exploitation of resources by other interests, remaining in the country, so that it can be used sustainably. In addition, the Sisgen (National Genetic Heritage System) currently invades researchers who make use of the Brazilian biome without record of objectives and research derivations. Consequently, it increases the possibility of developing new medicines from bioactive compounds from native plants for Brazilian researchers. This increases the need for preclinical studies and toxicology tests that provide information on the efficacy and safety of its use, thus allowing a quality therapeutic option without health hazard. In Parana many native plants have medicinal properties, and several have their use in traditional local medicine, as well as Tarumã. This plant of the genus Vitex and of the species Megotamica (Spreng) Moldeke is used in traditional medicine as an adjunct in the treatment of various diseases. Its indication for popular use covers rheumatic disorders, lung disorders. It is considered hypoglycemic, hypocholesterolemic, anti-inflammatory among other activities. However, data on the effect of Vitex megapotamica described in the literature are scarce regarding the safe use of the plant. In this context the present work carried out genotoxicity and preclinical toxicological studies on its prolonged use. Thus, the objective of this research was to evaluate preclinical oral toxicity after repeated doses of lyophilized methanolic crude extract obtained from leaves and stalks in male and female wistar rats. For the genotoxicity assays five groups with eight wistar rats in each group were used, for this, three doses of the Vitex megapotamic extract at the doses (100, 300 and 900 mg / kg) or negative control (filtered water) orally administered. and positive control cyclophosphamide monohydrate (20 mg / kg-Sigma –Aldrich) administered intraperitoneally after 24 hours. At the end, whole blood was collected in a tube containing Ethylenediamine Tetra Acetic Acid (EDTA) for the Comet test and subsequently the animals were euthanized. For the micronucleus test, the femurs were removed and the bone marrow was collected. Both trials demonstrated that the Vitex megapotamic extract did not induce any detectable genotoxicity signals, indicating that the extract is safe. For the study of preclinical oral toxicity after repeated doses of crude Vitex megapotamic extract in male and female wistar rats. Three doses of the extract (100, 300 and 900 mg / kg) or negative control (filtered water) were administered for 90 days orally. The animals were weighed weekly and clinical signs of systemic toxicity were analyzed during the treatment time. One day after the last treatment with the extract the animals were euthanized. All procedures were approved by the UNIPAR Research Ethics Committee. Blood samples were collected for hematological and biochemical analyzes, and organs for determination of relative, absolute weight and histopathology. No clinical signs of poisoning by the extract or death of these animals were observed. In the evaluation of body weight gain, biochemical, hematological parameters, relative and absolute weight and in the histopathological analysis of kidneys, liver and spleen, heart, intestine and pancreas, no statistically significant differences were found either. The results showed absence of oral toxicity after repeated doses with the crude extract of Vitex megapotamica. Thus, according to the protocols of the National Health Surveillance Agency (Anvisa) and the Organization for Economic Cooperation and Development (OECD), as regards toxicological tests, this plant species in the way that the experimental design was proposed, demonstrated be safe. However, further testing on reproductive toxicology and teratology models should be performed to characterize their safety amplitude at any exposure period.
Keywords
Tarumã, Toxicity, Herbal medicine.