Pesquisa
Toxoplasma gondii Induz Morte de Neurônios Mientéricos Gástricos em Ratos
Mestrado em Ciência Animal com Ênfase em Produtos Bioativos
Autor: Marcelo Sardeto Alves
Orientador: Débora de Mello Gonçales Sant’Ana
Defendido em: 23/11/2009
Resumo
A infecção pelo Toxoplasma gondii leva a lesões gástricas em humanos e animais. Estas lesões envolvem ulcerações, espessamento da parede e das pregas gástricas, espessamento e necrose da túnica mucosa e infiltrados inflamatórios e são descritas para diversas espécies animais. A presença de alterações gástricas indica que o plexo mientérico do estômago está sujeito a lesões diretas ou indiretas pelo T. gondii e a carência de relatos do plexo mientérico deste órgão nos levaram a propor este estudo. Objetivou-se quantificar e analisar morfologicamente os neurônios mientéricos das curvaturas gástrica menor e maior do estômago glandular de ratos infectados durante 30 dias por taquizoítos de Toxoplasma gondii. Foram utilizados 10 ratos machos distribuídos em dois grupos: grupo controle (GC) e grupo experimental (GE). Os animais do GC receberam solução salina por via oral e os animais do GE receberam, pela mesma via, 104 taquizoítos de Toxoplasma gondii de uma cepa genótipo III (cepa BTU II). Após 30 dias, sob anestesia, colheu-se sangue dos animais visando detecção de anticorpos séricos anti-T. gondii pelo método de aglutinação direta. Foi realizada eutanásia para retirada do estômago, que foi dissecado sob estereomicroscópio para retirada da túnica mucosa e tela submucosa. Preparados de membrana foram corados pela técnica de Giemsa. A quantificação dos neurônios mientéricos foi realizada com o auxílio de microscópio com objetiva de 40X em 40 campos microscópicos para a região da curvatura gástrica menor e 40 campos para a curvatura gástrica maior do estômago glandular de animais de ambos os grupos. Mensurou-se a área do corpo celular de 50 neurônios mientéricos de cada região e para cada animal. Neste estudo, os animais não apresentaram nenhum sinal clínico da toxoplasmose. Não foram vistos pontos de lesão ou hemorragia que pudessem ser detectados macroscopicamente nos estômagos. Os animais do GE tiveram resultado positivo para presença de anticorpos anti-T. gondii, enquanto os do GC tiveram resultado negativo. Os animais do grupo experimental apresentaram uma redução de 14,73% no peso médio dos estômagos (1,39 ± 0,07g) quando comparado aos do grupo controle (1,63 ± 0,02g) (p=0,001). Observou-se uma redução na média da área estomacal de 17,12% entre o grupo controle (7,01 ± 1,05cm²) e experimental (5,81 ± 1,51cm²), porém diferença esta não significativa (p= 0,091). Não foi visualizada nenhuma forma de vida do T. gondii no interior dos neurônios. Quando comparada a densidade populacional de neurônios mientéricos da região da curvatura gástrica menor do estômago de animais do grupo controle com animais do grupo experimental, foi possível verificar uma diferença significativa (p= 0,012). A mensuração neuronal não apresentou diferença significativa entre os grupos em nenhuma das curvaturas gástricas. Verificou-se que a infecção experimental crônica provocada pela cepa tipo III de Toxoplasma gondii em ratos reduziu a densidade de neurônios mientéricos apenas na região da curvatura gástrica menor do estômago glandular, não levando a alterações significativas no tamanho dos neurônios.
Palavras-chave
estômago, toxoplasmose, sistema nervoso entérico, plexo mientérico
Title
Toxoplasma gondii INDUCES DEATH OF GASTRIC MYENTERIC NEURONS IN RATS
Abstract
The infection with Toxoplasma gondii results in gastric lesions in humans and animals. They involve ulceration, thickening of the gastric wall and folds, thickening and necrosis of the tunica mucosa and inflammatory infiltrates, being described for several animal species. The presence of gastric changes indicate that the myenteric plexus of the stomach is subject to direct and indirect lesions by T. gondii and the lack of reports on the myenteric plexus of this organs led us to propose this study which had the purpose of quantifying and morphologically analyzing the myenteric neurons on the small and large gastric curvature of the glandular stomach of rats infected with Toxoplasma gondii tachyzoites for 30 days. Ten male rats were assigned into two groups: Control Group (CG) and Experimental Group (EG). The animals from the CG received saline solution orally whereas the EG animals received 104 tachyzoites of the T. gondii genotype III strain (BTU II). After 30 days, under anesthesia, the animals had their blood collected for the detection of anti-T.gondii seric antibodies by direct agglutination. Euthanasia was conducted for the removal of the stomach, which was dissected under the stereomicroscope for the removal of the tunica mucosa and the tela submucosa. Whole mounts were stained with Giemsa. Quantification of the myenteric neurons was conducted by using a 40X-objective microscope in 40 microscopic fields for the region of the small gastric curvature and 40 fields for the large gastric curvature of the glandular stomach of the animals from both groups. The cell body of 50 myenteric neurons from each region was measured for each animal. In this study, the animals presented no clinical sign of toxoplasmosis. Lesion points or hemorrhage which could be macroscopically detected in the stomachs were not seen.The results for the presence of anti-T. gondii antibodies were positive for the EG and negative for the CG. The EG animals presented 14.73% decrease of the mean stomach weight (1.39 ± 0.07g) when compared to the CG (1.63 ± 0.02g) (p=0.001). A 17.12% decrease of the mean stomach area was observed for both the CG (7.01 ± 1.05cm²) and the EG (5.81 ± 1.51cm²); however, this was not a significant difference (p=0.091). No form of life of T. gondii was observed inside the neurons. Significant difference (p=0.012) was verified while comparing the population density of myenteric neurons of the small gastric curvature region of the stomach of the CG and EG animals. Neuronal measurement presented no significant difference between the groups with respect to the gastric curvatures. Chronic experimental infection caused by the type III strain of Toxoplasma gondii was verified to reduce myenteric neuron density only in the small gastric curvature region of the glandular stomach, not resulting in significant changes on the size of the neurons.
Keywords
stomach, toxoplasmosis, enteric nervous system, myenteric plexus